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產(chǎn)品介紹：

別藻藍蛋白(Allophycocyanin ,APC)是一種從紅藻中提純的高亮度藻膽蛋白，屬于遠紅色熒光，具有很高的量子產(chǎn)量。激光594 nm和633 nm處激發(fā)其發(fā)光，在650 nm處吸收峰最大，在660 nm處熒光發(fā)射峰最大。APC比普通的化學(xué)發(fā)光強100倍，在普通應用中，其至少可以提高靈敏度5-10倍，主要用于流式細胞術(shù)、微陣列分析、ELISAs等。APC主要優(yōu)點(diǎn)是發(fā)射長(cháng)波熒光，抗淬滅性強，高水溶性，均質(zhì)結構，分子量確定。

基本原理：

本試劑盒利用抗體和APC上游離的氨基，采用定向對接偶聯(lián)技術(shù)將抗體分子與APC共價(jià)偶聯(lián)，主要特點(diǎn)：

ü  試劑盒組分齊全，操作簡(jiǎn)單，只要按照操作步驟進(jìn)行便可得到高品質(zhì)APC偶聯(lián)抗體；

ü  本試劑盒所配置的APC為高純度，高活性熒光蛋白，熒光發(fā)光效率更高；

ü  本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù)，熒光蛋白和抗體都不會(huì )發(fā)生自連，保證偶聯(lián)物的特異性和均一性；

ü  試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長(cháng)臂，確保不會(huì )因為蛋白質(zhì)位阻而影響發(fā)光效率；

ü  鑒于A(yíng)PC的蛋白骨架特性，其抗淬滅能力更強。

試劑盒已經(jīng)提供材料：

ü  活化APC蛋白         1mg  可用于標記0.5mg抗體

ü  標記緩沖液           30ml

ü  抗體修飾試劑         2mg*1支（臨用前加1ml水）

ü  30KMWCO超濾管        2支

ü  封閉試劑             2mg*1支 使用時(shí)加DMSO 200ul

ü  DMSO溶劑            1ml*1支

ü  說(shuō)明書(shū)               1份

其他需要自備試劑材料：

2  待標記的生物分子；

2  移液器及吸頭；

2  去離子水。

試劑盒儲存

試劑盒抗體修飾試劑放在-20?C，其余組分放在2-8℃可保存6個(gè)月以上。

試劑盒操作流程：

1.抗體的修飾

1）抗體修飾試劑溶解于ddH2O配制成2mg/ml的抗體修飾試劑溶液。

2）取待標記抗體（純度>90%），濃度調整到 5mg/ml以上為宜，按照每毫克抗體加入5μl 抗體修飾試劑溶液，輕輕混勻，在室溫下攪拌反應 60-90分鐘。

2.活化APC蛋白與抗體偶聯(lián)

1）用標記緩沖液復溶活化APC蛋白，濃度調整為5mg/ml；

2）將修飾抗體與活化APC蛋白，按照質(zhì)量比1:2比例（每毫克修飾抗體對應2毫克活化APC蛋白）混合，室溫避光反應2小時(shí)；

3）將封閉試劑管中加入200ul DMSO,配置成10mg/ml封閉試劑溶液；按照每毫克抗體3.4ul的體積加入步驟2）反應產(chǎn)物中，封閉未反應完的活性基團；

4）標記好的抗體分裝，加入適當保護劑，-20℃保存備用。