一、昆蟲(chóng)蛋白表達服務(wù)簡(jiǎn)介
桿狀病毒-昆蟲(chóng)表達系統,憑借其易于篩選、具有翻譯后修飾功能及高表達水平的優(yōu)勢,成為當今應用較廣泛的真核表達系統之一武漢科斯坦生物的桿狀病毒-昆蟲(chóng)蛋白表達服務(wù),采用經(jīng)典的Bac-to-Bac表達體系,并加以改進(jìn)。在表達方式(胞內或分泌),信號肽選擇,細胞培養方式及細胞選擇(Sf9Sf21Hi-5)方面有著(zhù)豐富的案例經(jīng)驗??蔀閲鴥韧馑幤?,高校及科研客戶(hù)提供高達200L的蛋白表達純化服務(wù)。
二、武漢科斯坦生物優(yōu)勢
1高成功率:科斯坦生物桿狀病毒-昆蟲(chóng)表達系統蛋白表達目前還沒(méi)有失敗案例。
2成熟的設計方案及條件篩選體系:根據蛋白性質(zhì)選擇胞內表達或分泌表達,針對分泌表達可為客戶(hù)選擇高效分泌信號肽。表達細胞:Sf9、Sf21Hi-5,通過(guò)測試不同時(shí)間的MOI,摸索最佳表達條件以達到最優(yōu)表達量。
3大規模生產(chǎn):可同時(shí)進(jìn)行200L體系的表達及純化。
4一站式服務(wù):基因設計及優(yōu)化病毒生產(chǎn)、蛋白表達條件優(yōu)化、蛋白純化及后續加工處理、數據及報告整理。
二、服務(wù)內容
服務(wù)名稱(chēng) | 服務(wù)內容 | 服務(wù)周期 | |
表達體系選擇 | 表達載體:常規商業(yè)化載體系列、經(jīng)武漢科斯坦改造后的表達載體 表達細胞:Sf9 Sf21 Hi-5 |
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表達載體構建 | 基因優(yōu)化及設計、基因合成及亞克隆 | 2-4周 | |
表達及純化測試 | 轉化及Bacmid鑒定、P1代病毒生產(chǎn)及表達測 試(SDS-PAGE and/or WB)、P2代病毒生 產(chǎn)及MOI測試(SDS-PAGE and/or WB)、最 優(yōu)條件200m1擴大及純化測試、標簽去除測試 (可選) | 3-5周 | |
1-10L表達及純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白 buffer置換濃縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化 后蛋白、MS鑒定(可選)、標簽去除(可 選) | 1-3周 | |
大規模發(fā)酵與純化 | 蛋白親和純化(或其他純化方式)、蛋白 buffer置換濃縮、SDS-PAGE/WB鑒定純化 后蛋白、MS鑒定(可選) | 10-20L | 2-4周 |
20-50L | 3-6周 | ||
50L 以上 | 4-12周 |
三、表達案例
昆蟲(chóng)蛋白表達服務(wù)訂單,包含1L表達及純化。由于表達量達到了368mg/L(純化后),純化測試即可獲得足量的蛋白。經(jīng)客戶(hù)驗證,證明其活性良好,我們即刻交付約60mg蛋白,該訂單在純化測試階段結束。1L放大及純化費用退還予客戶(hù)。
四、咨詢(xún)與訂購
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