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  • 產(chǎn)品名稱(chēng)： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號： CSK00013
  • 貨期： 現貨
  • 價(jià)格與訂購： 2880
  • 數量：
    庫存： 100
  • 規格：
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    產(chǎn)品名稱(chēng)（Product Name）
    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
    貨號（Catalog#）
    CSK00013
    產(chǎn)品描述（Description）
    本試劑盒采用雙抗夾心ELISA定量分析技術(shù)，將抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體預先包被在酶標板上，之后將標準品或分析樣本加入到微孔中，樣本中Nucleocapsid蛋白會(huì )被預包被的抗體捕獲，清洗掉未結合的物質(zhì)后，將生物素標記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體加入到微孔中反應，形成夾心復合物，再加入HRP標記的鏈霉親和素，清洗掉未結合的抗體及酶試劑之后，將顯色液添加到微孔中顯色，顯色強度與樣品中Nucleocapsid蛋白濃度成正比。
    本試劑盒用于測定支氣管肺泡灌洗液、鼻咽拭子樣本或重組表達樣本中Nucleocapsid蛋白的濃度。
    穩定性&儲存（Stability &Storage）
    收到試劑盒后請將標準品、檢測溶液 A、檢測溶液 B 以及預包板保存于-20℃，封板膜放置于常溫保存,其余試劑請置于 4 ℃保存備用。
    試劑盒按推薦溫度保存6個(gè)月，信號強度降低小于 10%。
    運輸方式（Shipping）
    藍冰運輸
    使用方法（Standard Operating Procedure）
    所需設備及試劑
    450 nm濾光片酶標儀，含540 nm或570nm校正波長(cháng)更佳
    單道或多道微量移液器，移液器槍頭
    去離子水
    500 mL量筒
    樣品稀釋管或不同規格EP管
    吸水紙
     
    一、試劑準備
    使用前將所有試劑和樣本置于室溫平衡。
    1. 20×濃縮清洗液：如果濃縮清洗液中有晶體析出，平衡至室溫并搖勻，直到晶體完全溶解，25mL濃縮清洗液使用去離子水定容至500mL，得到清洗液。
    2. 用2mL標準品/樣本稀釋液溶解Nucleocapsid蛋白標準品凍干粉，溶解后標準品濃度為80ng/mL。輕輕混勻后靜置10分鐘，然后進(jìn)行標準品的稀釋, 準備 7 個(gè)稀釋標準品的 EP 管，每個(gè) EP 管中加入500μL的標準品稀釋液，依次倍比稀釋成 80ng/mL、 40ng/mL、20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、2.5 ng/mL、 1.25ng/mL, 標準品/樣本稀釋液（0ng/mL）直接作為空白孔。
    3. 檢測溶液A（生物素標記）：臨用前震蕩混勻后用掌上離心機瞬時(shí)離心，使液體集中于管底，使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
    4. 檢測溶液B（HRP標記）：臨用前震蕩混勻后用掌上離心機瞬時(shí)離心，使液體集中于管底，使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
    5. 顯色液：避光保存，顯色時(shí)100μL /孔。
    6. 終止液：顯色完畢后50μL /孔。
     
    二、實(shí)驗步驟
    使用前將所有試劑和樣本置于室溫，建議對所有標準品、對照品和樣本進(jìn)行一式兩份的分析。
    1. 按照前面章節的指示準備所有試劑和樣本。
    2. 從板架上取下多余的微孔板條，將其放回裝有干燥劑包的鋁箔袋中，然后重新密封保存于-20℃。
    3. 每孔加入100μL標準品或樣本，用封板膜封住，37℃孵育60分鐘。
    4. 棄去孔內液體，每孔加入 300μL的清洗液，輕微震蕩后棄去孔內液體，將酶標板倒扣在吸水紙上輕拍，使殘留在孔內的液體全部去除，重復洗板 3 次，此過(guò)程也可采用尖嘴噴射瓶，多道移液器或自動(dòng)洗板機來(lái)完成。
    5. 每孔加入100μL檢測溶液A（生物素標記），用新的封板膜封住，37℃孵育30分鐘。
    6. 重復步驟4中的洗板程序。
    7. 每孔加入100μL檢測溶液B（HRP標記），用新的封板膜封住，37℃孵育30分鐘。
    8. 重復步驟4中的洗板程序。
    9. 每孔加入100μL顯色液，37℃避光顯色5-10分鐘。
    10. 每孔加入50μL終止液，孔里的顏色應該由藍色變至黃色，如果孔內顏色為綠色或顏色變化不均勻，輕輕震動(dòng)酶標板使顏色均一。
    11. 擦干酶標板底部水氣，立刻用酶標儀在 450nm 波長(cháng)測量各孔的O.D.值，如果波長(cháng)校正可用，則設置為540 nm或570 nm，如果波長(cháng)校正不可用，則從450 nm的讀數中減去540 nm或570 nm的讀數，這種修正可去除酶標板讀數中的光學(xué)偏差，如果沒(méi)有校正波長(cháng)，可直接讀取450 nm的讀數，但讀值有可能不準確。
     
    三、標準曲線(xiàn)制作
    每個(gè)標準品和樣本的復孔平均O.D.值，減去空白孔平均O.D.值后，以標準品的濃度為橫坐標，O.D.值為縱坐標，繪出標準曲線(xiàn)（R2值越趨近于1曲線(xiàn)越精確），然后再將樣本的平均O.D.值代入標準曲線(xiàn)的回歸方程式，計算出樣品濃度。
    如果樣品已經(jīng)稀釋?zhuān)瑥臉藴是€(xiàn)上算出的濃度需乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shí)際濃度。
     
    四、標曲案例
    標準曲線(xiàn)僅用于演示，每次實(shí)驗均需生成單獨的標準曲線(xiàn)。

    五、檢測范圍
    1.25ng/mL—80ng/mL
     
    六、最低檢測限(MDD)
    ＜1ng/mL
    MDD是測試20個(gè)零標準（標準品/樣本稀釋液）的平均O.D.值上加兩倍標準差后計算相應的濃度來(lái)確定的。
     
    七、精密度
    批內差： CV<12%
    批間差： CV<15%
     
    八、穩定性
    試劑盒按推薦溫度保存6個(gè)月，信號強度降低小于10%。
    組分和說(shuō)明（Component and Instruction）

    樣品清單及儲存條件

    樣品名稱(chēng)

    規格

    描述

    推薦儲存條件

    預包板

    1 板

    96孔聚苯乙烯微孔板（12條*8孔），預包被抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體

    密封狀態(tài)放置于-20℃保存

    標準品

    1 瓶

    160ng重組Nucleocapsid蛋白凍干粉（含防腐劑），臨用前復溶于2mL標準品/樣本稀釋液，終濃度為80ng/mL

    放置于-20℃保存

    檢測溶液A

     

    1 瓶

    120μL 生物素標記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體（含防腐劑），臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

    放置于-20℃保存

    檢測溶液B

     

    1 瓶

    120μL HRP標記的鏈酶親和素（含防腐劑），臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

    放置于-20℃保存

    標準品/樣本稀釋液

    1 瓶

    25 mL稀釋液（含防腐劑），用于標準品、待測樣本的稀釋

    放置于4℃保存

    檢測溶液稀釋液

    1 瓶

    25 mL稀釋液（含防腐劑），用于檢測溶液A和檢測溶液B的稀釋

    放置于4℃保存

    濃縮清洗液

    1 瓶

    25 mL （20×）濃縮清洗液（含防腐劑），臨用前用去離子水1:20稀釋至工作濃度

    放置于4℃保存

    顯色液

    1 瓶

    12 mL TMB（四甲基聯(lián)苯胺）

    放置于4℃保存

    終止液

    1 瓶

    6 mL

    放置于4℃保存

    封板膜

    4 片

    用于實(shí)驗中封閉酶標板

    放置于常溫保存

    在試劑盒保質(zhì)期內使用

    icon
    Note
    For research use only .