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- 產(chǎn)品名稱(chēng)： 小鼠單克隆抗體Ig類(lèi)/亞類(lèi)/亞型鑒定ELISA試劑盒
- 產(chǎn)品貨號： CSC060101-L
- 貨期： 現貨
- 價(jià)格與訂購： 2400
- 數量：
庫存： 5
- 規格： 盒
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
試劑原理
本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養上清中單克隆抗體或特異親和純化單克隆抗體的類(lèi)和亞類(lèi)（可區分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda）。采用小鼠抗體共有位點(diǎn)的二抗包 被微孔板，與加入的培養上清中的小鼠抗體結合，再加入HRP標記的抗小鼠各類(lèi)、亞類(lèi)、亞型的抗體來(lái)分別反應， 隨后用TMB底物系統顯色并用稀硫酸終止，再通過(guò)酶標儀檢測吸光度來(lái)判斷被測單克隆抗體的類(lèi)或亞類(lèi)。本 試劑盒具有極高的分辨率，是您鑒定小鼠單克隆抗體類(lèi)、亞類(lèi)、亞型的可靠工具。
試劑組份
| 酶標板 含自封袋2個(gè) | 2ⅹ96孔 | 標本稀釋液 | 15ml |
| 通用陽(yáng)性對照 | 1.8ml | 顯色劑A | 15ml |
| 通用陰性對照 | 1.8ml | 顯色劑B | 15ml |
| 酶標二抗 8種 | 6×3.2ml | 反應終止液 | 15ml |
| 20×清洗液 | 50mL | 加樣圖 | 2份 |
| 封板膜 | 4張 | 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
使用范圍
用于培養上清中小鼠單克隆抗體Ig類(lèi)、亞類(lèi)、亞型的鑒定以及相關(guān)內容的研究。
使用方法
1、首先將試劑盒恢復室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。
2、取出酶標板。每個(gè)標本需要8孔，陽(yáng)性對照8孔，陰性對照8孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。
3、將標本檢測孔每孔先加入標本稀釋液各50μl。然后將50μl細胞培養上清（或特異親和純化的抗體）再加入酶標微 孔板，每個(gè)標本加8孔；陽(yáng)性對照和陰性對照各8孔每孔100μl此處不加標本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機洗5遍）。再在每個(gè)標本的6孔中分別加入8種 酶標二抗各100μl，通用陽(yáng)性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機洗5遍）。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀(guān)察出結果，看顯色藍的那個(gè)孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)。更可將反應終止液（每孔50μl）終止反應后用酶標儀450nm測定波長(cháng)，630nm參考波長(cháng)雙波長(cháng)測定結果，參看高值孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類(lèi)或亞類(lèi)亞型(陽(yáng)性對照OD一般不小于0.8，陰性對照一般不高于0.15，陽(yáng)性判定標準：樣品OD大于陰性OD+0.15，陰性OD低于0.05按0.05算)。
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度、高特異性、結果容易判定。
保存條件
不開(kāi)啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過(guò)于頻繁開(kāi)啟使用有可能因此使效期縮短。
注意事項
1、雖然本試劑盒過(guò)期后很久還有使用價(jià)值但還是請您在標簽注明的有效期內使用。
2、在檢測腹水類(lèi)單抗時(shí)要稀釋到1/5萬(wàn)，雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類(lèi)樣品成分十分復雜，有干擾結果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的貨號為C060102-L的鑒定試劑。它會(huì )給您帶來(lái)滿(mǎn)意的結果,同時(shí)您也可以使用抗原包被板替換試劑盒內的包被板來(lái)解決此類(lèi)問(wèn)題，但這種情況下陽(yáng)性對照不顯色屬于正常。
3、手洗板子時(shí)一定要把孔加滿(mǎn)，停留10秒然后棄盡，甩干凈。特別是在酶標二抗溫育后洗板時(shí)一定要把酶吸出而不是甩出，要吸凈。這個(gè)在手工洗板時(shí)對結果很重要。
4、一次沒(méi)用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5、拿放板子時(shí)不要劇烈抖動(dòng)，以免孔間交叉污染出現錯誤結果。
6、本試劑一般不會(huì )出現兩個(gè)陽(yáng)性，但出現兩個(gè)陽(yáng)性的現象現實(shí)中是真實(shí)存在的，一般會(huì )一個(gè)OD很高,另一個(gè)很低但卻還能判為陽(yáng)性，實(shí)驗分析表明這種情況下以OD高值孔為準，出現這種情況有多重原因：A、培養的細胞中有“飼養細胞”殘留，B、由于單抗研制存在人工干預步驟因此抗體本身有可能會(huì )存在亞類(lèi)結構上的輕微變異， C、樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水，D、上清出現少量污染，E、實(shí)驗操作粗放，F、加錯試劑。
特別提示
不具備ELISA基礎知識和操作的人員不要完成此實(shí)驗或類(lèi)似實(shí)驗，因為這可能會(huì )給您帶來(lái)錯誤的結果和不必要的損失，實(shí)驗中有疑問(wèn)請聯(lián)系我們技術(shù)團隊
Note
For research use only .
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