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- 產(chǎn)品名稱(chēng)： 人角膜上皮細胞（TPH104）
- 產(chǎn)品貨號： TPH104
- 貨期： 現貨
- 價(jià)格與訂購： 8000
- 數量：
庫存： 5
- 規格： T25瓶
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
細胞簡(jiǎn)介
人角膜上皮細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì )不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下:①角膜是唯一的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞;②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統;③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養對研究角膜的生理學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長(cháng)因子和藥物對細胞生長(cháng)的影響。
方法簡(jiǎn)介
人角膜上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10 cells/瓶。
基本信息
組織來(lái)源:眼角膜組織
包裝規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞形態(tài):上皮細胞樣
推薦換液:2~3次/周
生長(cháng)特性:貼壁生長(cháng)
推薦傳代:1:2
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5ug/cm2)
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養保存
培養體系:人角膜上皮細胞專(zhuān)用培養基(TPHM104)培養條件:氣相:空氣，95%;CO2，5%;溫度:37℃
細胞消化
1．吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次;
2．添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中，輕微轉動(dòng)培養瓶至消化液覆
蓋整個(gè)培養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37°℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀(guān)察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養基終止消化;
3．用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養瓶傳代，然后補充新鮮的完全
培養基至5mL，置于37°C、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;4．待細胞完全貼壁后，培養觀(guān)察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
細胞實(shí)驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實(shí)驗器皿（如?，幣榔?、培養板、共聚焦培養皿等）時(shí)，需要對實(shí)驗器皿進(jìn)行包被，以增強細胞貼壁性，
避免細胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗;包被條件常選用鼠尾膠原l(2-5ug/cm2)，多聚賴(lài)氨酸PLL (0.1mg/ml) ,明膠(0.1%)，依據細胞種類(lèi)
質(zhì)檢結果
人角膜上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
注意事項
1.收到常溫細胞后，請檢查產(chǎn)品包裝狀況，若發(fā)現破損、溢出及污染，請及時(shí)聯(lián)系我們。
2.先不打開(kāi)培養瓶蓋，用75%酒精處理培養瓶表面，如果是貼壁細胞，請在培養箱中靜置2-3小時(shí)（根據細胞密度狀況決定）用來(lái)穩定細胞狀態(tài)。
如果是懸浮細胞則不需要靜置，直接按照懸浮細胞步驟操作。
3.靜置完成后，在顯微鏡下確認細胞生長(cháng)狀態(tài)并拍照記錄。(照片能有效幫助我們提供售后服務(wù))
4.細胞培養過(guò)程中如有異常狀況，歡迎進(jìn)行技術(shù)交流。
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Note
For research use only.
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