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  • 產(chǎn)品名稱(chēng)： Cdc42 Activation Assay Kit
  • 產(chǎn)品貨號： 80701
  • 貨期： 現貨
  • 價(jià)格與訂購： 6800
  • 數量：
    庫存： 5
  • 規格： 96T
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    產(chǎn)品說(shuō)明
         小G蛋白是從屬于細胞調節因子中的一個(gè)超家族。Rho家族是小G蛋白中的一個(gè)亞家族，它在細胞運動(dòng)、細胞分裂以及基因轉錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的Cdc42就屬于Rho亞家族中的一種， Cdc42參與生理活動(dòng)過(guò)程中其分子結構會(huì )呈現出2種相互轉換的形式：與GTP結合的激活狀態(tài)和與GDP結合的非活性狀態(tài)。
           目前Cdc42蛋白活性的檢測主要是依據小GTP酶Cdc42可以與p21活化激酶（PAK）的p21結合區域（PBD）結合，使PAK活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而間接的進(jìn)行Cdc42活性功能的監測。然而此方法在檢測過(guò)程中存在著(zhù)一定的局限性比如GTP水解成GDP的速度過(guò)快以及Cdc42-GTP結合蛋白與p21結合區域之間較低的親和力，導致這種檢測方法的重復性較差。
          武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司推出的Cdc42活性檢測試劑盒主要是依據單克隆抗體能夠特異性的識別Cdc42-GTP結合蛋白，而不識別Cdc42-GDP結合蛋白，進(jìn)而簡(jiǎn)單并且快速的進(jìn)行Cdc42的活性檢測。同時(shí)試劑盒中的Cdc42-GTP單克隆抗體也可以進(jìn)行免疫組化實(shí)驗中細胞和組織中Cdc42的活性監測。每套試劑盒可以進(jìn)行20次檢測。
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    檢測原理
    武漢科斯坦生物技術(shù)有限公司的Cdc42活性檢測試劑盒主要是利用識別蛋白特異形態(tài)的Cdc42-GTP單克隆抗體特異性的去檢測細胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行GTPγS活化處理）活性Cdc42-GTP的水平。簡(jiǎn)言之，特異性識別Cdc42活化構象的鼠單克隆抗體可以特異性結合細胞裂解液中的Cdc42-GTP活性蛋白，然后利用protein A/G將抗原抗體的結合物吸附下來(lái)，再利用特異性識別Cdc42活化構象的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測。
    試劑盒成分
    1. 特異性識別Cdc42活性構象的鼠單克隆抗體（Anti-active Cdc42, Mouse MonoclonalAntibody (Catalog No. 26905)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH7.4）并包含50%的甘油和0.05%的疊氮化鈉。此抗體可以特異性識別所有脊椎動(dòng)物中的Cdc42-GTP。
    2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul包含200ul Protein A/G agarose     和200ul 20%乙醇溶液。（使用時(shí)溶液需要充分混勻，再吸?。?/div>
    3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL包含250 mM Tris-HCl (pH 8.0),     750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
    4. 特異性識別Cdc42活性構象的兔多克隆抗體（Anti-Cdc42, Rabbit Polyclonal Antibody  (Catalog No.21010)）：小管裝--30ul (抗體濃度是1mg/ml)，抗體溶于PBS（pH 7.4）并包含有   50%的甘油
    5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實(shí)驗中0.5mL細胞裂解液使用      5ul GTPγS標記。
    6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實(shí)驗中0.5mL細胞裂解液使用5ul GDP標記。
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    儲存條件
    試劑盒的成分在試劑盒的有效期限內必須存放于4°C條件下保存。
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    Note
    For Research Use Only.